Retinoic acid is required for the initiation of outgrowth in the chick limb bud

Quand on a trouvé une molécule qui déplace les bourgeons des membres du poulet, et que c’est une protéine, un facteur de transcription à l’occurrence, on se demande si on ne peut trouver quelque chose de plus simple. Et il suffit de chercher pour trouver (voir figure 2, (b)), dans ce cas dans la littérature.
A nouveau se pose la question à Vincent Fleury, comment ces résultats expérimentaux pourraient se concilier avec son hypothèse ?
A mon avis ce n’est pas possible.
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Retinoic acid is required for the initiation of outgrowth in the chick limb bud

Thomas Stratford, Claire Horton and Malcolm Maden

Current Biology1996, Vol 6 No 9

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Tbx3 can alter limb position along the rostrocaudal axis of the developing embryo

Mince, un gène dont l’expression ectopique déplace les « pattes » ! Il y en a qui pensent que les emplacements sont dus à des vortexes, faudrait qu’ils expliquent ça, aussi. Ou pourquoi l’expression du dit gène affecte l’emplacement des « fantômes » des buds formés par des tourbillons.
Vincent Fleury, une idée ?


10.1242/10.1242/dev.01787, fig 2

Tbx3 can alter limb position along the rostrocaudal axis of the developing embryo

Charalampos Rallis, Jo Del Buono and Malcolm P. O. Logan

Development 132, 1961-1970 (2005) doi: 10.1242/10.1242/dev.01787

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Cell movement during chick primitive streak formation

Cell movement during chick primitive streak formation

Manli Chuai, Wei Zeng, Xuesong Yang, Veronika Boychenko, James A. Glazier and Cornelis J. Weijer

Developmental Biology Volume 296, Issue 1, 1 August 2006, Pages 137-149


Tiens, tiens, il n’y a pas que moi qui voit seulement « two counter-rotating vortices ». Il y en a d’autres.
Looking forward to see L2/R2.

2crvsynthesismovie1.jpgCell movement during primitive streak initiation involves two counter-rotating vortices
Previously we have shown using optical flow image processing techniques and by following the trajectories of multiple groups of DiI labelled cells in prestreak chick embryos that the tissue movements occurring during streak formation are detectable from pre-streak stages onwards and are organised in two counter rotating cell flow patterns that meet at the site of streak formation (Cui et al., 2005). To be able to analyse these cell movements at the individual cell level, we developed an electroporation protocol that allowed us to transfect scattered cells in the early chick–embryo epiblast cells with GFP expression constructs. Our electroporation protocol typically results in the transfection of several hundred to thousands of cells in the area pellucida and area opaca in a mosaic pattern (Figs. 1A, B, C). Sectioning of the early transfected embryos confirmed that the majority of the cells (>90%) transfected were found in the epiblast. (Figs. 1D, E). GFP fluorescence of expression constructs under the control of the CMV promoter becomes visible 2–4 h after transfection and the fluorescence intensity/cell normally increases during the next 5–10 h of incubation. This labelling method allowed us to track the movement and division of individual cells for up to 24 h of development. Every track shown in Figs. 2C, F, I is the movement trajectory of an individual GFP-expressing cell, over a 4-h period. These cell tracking experiments confirmed the existence of the two counter-rotating cell flows in the epiblast, which merged at the site for the future streak primitive streak initiation (Fig. 2). The flows become visible well before any optically-dense structure in the streak are detected. Cells overlaying Koller’s sickle move into the streak and are being replaced by cells from more antero-lateral positions. Cells just anterior to the Sickle move forward and sideways into the area destined to become the neural plate (Hatada and Stern, 1994). The cells in the centres of both counter-rotating flows move relatively little. These centres do not coincide with any known morphological structures, suggesting that they are not special signalling centres. Speeds of cell movement vary from 0 to 2 μm/min, with the highest speeds at the periphery of the vortices. These data confirm our previous observations using DiI labelling (Cui et al., 2005), with better spatial coverage and at cellular resolution.

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Si les couples de vortexes L2/R2existaient,
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update 31 août 2007

En fait, ça va être encore plus difficile que je ne le pensais pour Vincent Fleury. En me posant toujours la question de la possibilité qu’un vortex puisse soulever les cellules, je suis revenu vers la vidéo et le papier (Cell movement during chick primitive streak formation) pour me rendre compte d’abord visuellement, puis en l’ayant mesurée, que la vitesse au centre des vortexes est vraiment faible, largement plus faible que celle des cellules en périphérie; c’est aussi le constat des auteurs, qui écrivent :

These cell tracking experiments confirmed the existence of the two counter-rotating cell flows in the epiblast, which merged at the site for the future streak primitive streak initiation (Fig. 2). The flows become visible well before any optically-dense structure in the streak are detected. Cells overlaying Koller’s sickle move into the streak and are being replaced by cells from more antero-lateral positions. Cells just anterior to the Sickle move forward and sideways into the area destined to become the neural plate (Hatada, Y., Stern, C.D., 1994. A fate map of the epiblast of the early chick embryo. Development 120, 2879–2889). The cells in the centres of both counter-rotating flows move relatively little. These centres do not coincide with any known morphological structures, suggesting that they are not special signalling centres. Speeds of cell movement vary from 0 to 2 μm/min, with the highest speeds at the periphery of the vortices. These data confirm our previous observations using DiI labelling (Cui, C., Yang, X., Chuai, M., Glazier, J.A., Weijer, C.J., 2005. Analysis of tissue flow patterns during primitive streak formation in the chick embryo. Dev. Biol. 284, 37–47), with better spatial coverage and at cellular resolution. [page 139, right column, end of §1]

Si je ne me trompe pas la dépression est d’autant plus forte que la vitesse du flux est grande, n’est-ce pas ?

Par ailleurs, les trajectoires semblent être parallèles, et ne se croiser que rarement; les cellules périphériques ne venant pas vers le centre du vortex. Ca ne colle pas avec les schémas que Vincent Fleury nous propose.

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Ceci est un commentaire, élevé au statut de post, pour y inclure une image (pour l’instant) et les vidéos dont je donne les liens dans un avenir proche, fonctions non disponibles sur WordPress à travers les commentaires. Il fait suite à comment-258. Je le range ainsi à la catégorie « post-it pour Fleury ». Il comporte quatre questions; si VF voudrait répondre, ça serait sympa de signaler à quelle question il répond et s’il souhaite inclure des images je suis toujours prêt à les inclure.


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